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細胞刮刀的實驗步驟你要了解嗎

點擊次數:5963 更新時間:2019-03-07
   細胞刮刀表面是一個新型的細胞培養處理表面,增加了表面濕潤的持久性和細胞吸附的穩定性超低吸附板的特征是共價結合的水凝膠層將細胞吸附、蛋白吸附和細胞的激活降到較低具有凝聚環的不可逆的蓋減少污染,統一邊角方便堆放帶有字母單孔識別,平底經過細胞吸附化處理(標注產品除外)經過伽馬射線滅菌,經過無熱源認證。
 
  細胞刮刀的刀片是由高分子材料TPE制成,長柄是由高分子材料ABS制成,主要是適用于收獲細胞,其優化設計,確保對細胞損傷,并盡可能接觸細胞生長的所有器皿表面。用于人工收獲細胞,優化設計確保對細胞較小的傷害并盡可能接觸細胞生長的所有表面。細胞刮刀常用于從培養皿中收獲細胞(尤其是干細胞)。
 
  細胞刮刀實驗步驟:無菌條件下取新生小牛大腦皮層灰質部,4℃D-Hank′s液洗滌4次,至無血跡殘留。剪成1mm3左右的組織碎塊并置于玻璃勻漿器內,加入兩倍體積的MEM培養基,勻漿上下20次?勻漿液先用100目(直徑149μm)尼龍網布式漏斗抽濾,培養基洗滌4次,收集濾液。然后用200目(直徑74μm)尼龍網布式漏斗抽濾,MEM培養基洗滌4次。細胞刮刀收集200目尼龍網上的組織(即牛腦微血管),將其置于離心管中,1500r/min離心洗滌10min。離心洗滌的腦微血管懸浮于的0.1%膠原酶中,旋渦振蕩15sec以充分混勻,置于37℃恒溫振蕩水浴箱中振蕩消化50min,取出后旋渦振蕩15sec,1500r/min離心10min,棄上清,用20%BCS的培養基懸浮,接種于明膠鋪被的培養瓶中(培養瓶中加入1%明膠-D-Hank′s液洗滌3ml,37℃孵箱中放置24h,用前倒掉明膠溶液即得明膠覆蓋的培養瓶),置于細胞培養箱中,37℃、5%CO2、飽和濕度條件下培養。靜置5~7天后,可見少量細胞生長,20%BCS的MEM培養液換液,以后每2~3天換液一次,至細胞長成致密單層后可傳代培養。